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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)對(duì)象為脫細(xì)胞基質(zhì)樣品,脫細(xì)胞基質(zhì)主要是通過(guò)去除細(xì)胞成分從組織或器官制備的天然支架;通過(guò)使用浸入式冷凍研磨儀破碎脫細(xì)胞基質(zhì),可以獲得其組織結(jié)構(gòu)和成分的詳細(xì)信息,用于樣品破碎后的組織學(xué)研究和生物醫(yī)學(xué)等研究領(lǐng)域。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:浸入式液氮冷凍研磨儀JXFSTPRP-Minicl
脫細(xì)胞基質(zhì)樣品的前處理實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程:
1.實(shí)驗(yàn)開(kāi)始操作前,需提前準(zhǔn)備好液氮冷凍研磨設(shè)備一臺(tái),實(shí)驗(yàn)耗材以及脫細(xì)胞基質(zhì)樣品若干
2.稱量取實(shí)驗(yàn)所需的樣本量,將其放入研磨罐中,將研磨罐放到研磨倉(cāng)內(nèi),扣好鎖扣,將研磨倉(cāng)放進(jìn)液氮桶中,向液氮桶中倒入液氮,直至浸沒(méi)研磨倉(cāng),蓋好蓋子。
3.打開(kāi)電源開(kāi)關(guān),點(diǎn)擊主界面“參數(shù)設(shè)置"按鈕,設(shè)置參數(shù)。設(shè)置預(yù)冷時(shí)間和研磨時(shí)間;循環(huán)預(yù)冷時(shí)間20s;循環(huán)若干次,運(yùn)行頻率18次/s;設(shè)置好后運(yùn)行。
4.按運(yùn)行鍵啟動(dòng),進(jìn)行預(yù)冷倒計(jì)時(shí),倒計(jì)時(shí)結(jié)束進(jìn)行樣品研磨。
5.研磨結(jié)束,關(guān)閉電源,將研磨罐從研磨倉(cāng)取出,用開(kāi)蓋工具打開(kāi)蓋子,取出樣品。
6.取出后的樣品又放回研磨罐中,重復(fù)以上步驟若干次后,進(jìn)行后續(xù)實(shí)驗(yàn)。
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1.材料樣品的韌性較強(qiáng),需液氮充分冷卻后,迅速高剪切/壓力下,研磨成細(xì)小顆粒
2.實(shí)驗(yàn)操作時(shí)要帶好防護(hù)手套,避免液氮凍傷
3.開(kāi)蓋時(shí)使用開(kāi)蓋工具,小心進(jìn)行
脫細(xì)胞基質(zhì)樣品的前處理實(shí)驗(yàn)研磨效果:
浸入式液氮冷凍研磨儀對(duì)脫細(xì)胞基質(zhì)樣品的前處理由上圖可看出,樣品已被破碎,且滿足樣品的實(shí)驗(yàn)需求;液氮冷凍研磨設(shè)備對(duì)脫細(xì)胞基質(zhì)樣品的低溫研磨確了樣品成分信息的完整保留,可消除樣品降解,避免破壞DNA和RNA,便于為后續(xù)樣品的實(shí)驗(yàn)分析提供準(zhǔn)確且可靠穩(wěn)定的實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)支持。
浸入式液氮冷凍研磨儀,體積小,功能強(qiáng)大;低溫研磨可使樣品的結(jié)構(gòu)和組成信息物生物活性得到保留;對(duì)細(xì)胞破碎可消除樣品降解,避免破壞DNA和RNA;選擇冷凍研磨技術(shù)成為保存樣品理化完整性的關(guān)鍵手段,是因?yàn)榈蜏叵率沟迷S多韌性和彈性的樣品脆性增加,從而容易進(jìn)行粉碎、混合、均化。實(shí)驗(yàn)設(shè)備采用便攜式設(shè)計(jì),體積極小,并有多種研磨組合方式,供不同應(yīng)用需求的用戶選擇。