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實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>此次實(shí)驗(yàn)是對(duì)豬皮組織為實(shí)驗(yàn)樣品進(jìn)行的前處理實(shí)驗(yàn)研磨破碎,以便對(duì)豬皮組織樣品內(nèi)的膠原蛋白或細(xì)胞進(jìn)行提取純化,并對(duì)其在藥物方向的應(yīng)用進(jìn)行實(shí)驗(yàn)研究。
實(shí)驗(yàn)設(shè)備:浸入式液氮冷凍研磨儀 JXFSTPRP-MiniCL
豬皮組織樣品前處理的實(shí)驗(yàn)操作步驟:
1.需要提前備好實(shí)驗(yàn)樣品前處理設(shè)備、研磨罐及其配置適用的研磨珠和處理好的(脫脂)豬皮組織樣品
2.取處理好的豬皮組織樣品將其剪切成小塊狀,放入研磨罐中,加入適用規(guī)格數(shù)量的研磨珠,蓋子蓋上
3.把研磨罐放入研磨儀中進(jìn)行固定,但要注意兩端的配平,扣好安全鎖,而后將研磨儀整個(gè)放入液氮中進(jìn)行預(yù)冷。
4.設(shè)置好儀器設(shè)備的運(yùn)行程序參數(shù),啟動(dòng)儀器,開啟儀器程序的運(yùn)轉(zhuǎn)(要嚴(yán)格按照程序設(shè)置,不然容易發(fā)生短路;在儀器運(yùn)行過程中要注意液氮盛放桶蓋要壓緊,桶中液氮余量要高于研磨罐的位置)在儀器程序結(jié)束后,即可得到破碎完成的豬皮組織樣品
5.把破碎后的樣品放入玻片上在顯微鏡下觀察直徑約20~70μm
實(shí)驗(yàn)注意事項(xiàng):
1.實(shí)驗(yàn)時(shí)需要將豬皮破碎成較小的碎片,直徑大約20mm左右 。
2.實(shí)驗(yàn)過后研磨罐及撞子可用酒精或在超聲波清洗機(jī)中進(jìn)行清洗消毒,烘干備用。
3.實(shí)驗(yàn)過程中,樣品的體積不能超過研磨罐的三分之一,留出足夠的空間讓撞子充分運(yùn)動(dòng)。
豬皮組織樣品前處理實(shí)驗(yàn)研磨效果對(duì)比圖:
浸入式液氮冷凍研磨儀對(duì)豬皮組織樣品的前處理效果由上圖可知;由于豬皮組織f韌性好,處理過程繁瑣,需要在低溫中進(jìn)行,在經(jīng)過液氮的低溫預(yù)冷,短時(shí)間內(nèi)便已完成對(duì)豬皮組織樣品的前處理實(shí)驗(yàn)操作且,能滿足樣品的實(shí)驗(yàn)要求。
浸入式液氮冷凍研磨儀對(duì)動(dòng)物組織樣品的液氮低溫研磨,能有效抑制核酸降解,保留酶的生物活性,更好地保護(hù)樣品。出料顆粒相較于手工研磨更細(xì)膩均勻,出料量也有明顯提升。提取出的組織成分在數(shù)量和質(zhì)量上比常規(guī)研磨效果更好。